【摘要】背景与目的：检测小鼠光气染毒后肺部氧化指标的改变及不同浓度氨水对其指标的影响，以探讨对光气肺损伤现场防护的新方法。材料与方法：动物按体重随机分为5组，每组10只，雌雄各半，分别为阴性对照组，阳性对照组，低剂量(10ml/L)氨水组，中剂量(20ml/L)氨水组及高剂量(40ml/L)氨水组。染毒柜内光气浓度23.8mg/m3，染毒5min。其中氨水组染毒柜内同时分别放置10ml/L、20ml/L和40ml/L氨水。染毒后3h，将动物断头处死，采血并取肺脏。荧光法分别检测肺脏的丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、还原性谷胱甘肽(Reducedglutathione,GSH)和氧化性谷胱甘肽(Oxidizedglutathione,GSSG)以及全血谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathioneperoxidase,GSH-Px)，同时进行全血分析。结果：阴性对照组与阳性对照组各项指标比较差异均有统计学意义；且不同剂量氨水组肺脏的MDA、GSSG含量均有减少，而肺脏GSH、全血GSH-Px差异无统计学意义。此外，各组WBC与阳性对照组比较有显著下降，RBC、HGB、PLT各组相似。结论：光气中毒后肺部有氧化损伤，暴露于光气时给予挥发性氨水进行现场消毒，可以减轻这种氧化损伤。
【关键词】光气；氨水；氧化损伤
中图分类号：R733.1文献标识码：A文章编号：1004－616X(2005)05－0269－03
光气既是重要的化工原料，又可作为军用毒剂，其对人体的主要毒害作用部位在肺部，其作用特点是接触当时刺激症状轻，经过一定的潜伏期后才出现严重病变，极易发生肺水肿甚至急性呼吸窘迫综合症[1]。急性光气中毒是常见的职业病，常发生于生产或使用过程中的意外事故，而个人未及时防护所致。由于目前还没有治疗光气中毒的特效药，一旦发生肺水肿，治疗十分困难[2]，因此对于光气的现场防护十分必要，以使早期症状得以纠正。本实验通过光气染毒同时，给予挥发性碱性中和液进行中和消毒，观察各种氧化指标的变化，进一步探讨急性光气中毒的早期防护手段。
1材料与方法
1.1实验动物及仪器试剂二级昆明小鼠50只，雌雄各半，体重(20.5±2.4)g，由第四军医大学实验动物中心提供。固体三光气购于润发化工有限公司；环己烷，N,N－二甲基甲酰胺，氨水均为分析纯，购于西安化学试剂厂；硫代巴比妥酸(Thiobarbiturate,TBA)购于Emerck公司；还原型谷胱甘肽(Reducedglutathione，GSH)、氧化型谷胱甘肽(Oxidizedglutathione,GSSG)购于上海药品采购站；邻苯二醛(O-phenaldehyde,OPT)、N-乙基马来酰亚胺(N-ethylmaleimide,NEM)购于华美公司。气体染毒柜由本教研室提供；Portasens气体检测仪产自荷兰AnalyticalTechnology公司；970CRT荧光分光光度计由上海三科仪器有限公司生产；D40-1型电动匀浆器产自浙江杭州仪表电机厂。
1.2中毒及处理方法动物按体重随机分为5组，每组10只，雌雄各半，分别为阴性对照组，阳性对照组，低剂量(10ml/L)氨水组，中剂量(20ml/L)氨水组及高剂量(40ml/L)氨水组。将各组动物置于染毒柜内染毒5min，用气体泄漏检测仪侧得光气浓度为23.8mg/m3。光气由固体三光气溶于环己烷，N,N－二甲基甲酰胺滴定产生。其中实验组动物染毒柜内分别放置10ml/L、20ml/L、40ml/L氨水，将动物置于放有氨水的容器之上，共同推入染毒柜内，放置1min使氨水得以挥发，然后进行染毒。
1.3检测指标和方法染毒后3h，将所有动物断头处死，采血并取肺脏。将肺脏称重，按1∶5加入生理盐水用电动匀浆器冰浴上制备为匀浆，3000r/min离心10min，取上清液待测。采用荧光分光光度计法[3，4]，分别测定了肺组织的丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、GSH、GSSG及全血的谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathionperoxidase,GSH-Px)。考马斯亮蓝法[5]测定蛋白。并进行全血分析。
1.4统计学方法结果采用平均数±标准差(－±s)表示，用SPSS11.0统计软件进行非参Kruskal-WallisH及Mann-WhitneyU检验。
2结果
2.1小鼠肺GSH、GSSG、MDA及全血GSH-Px的测定结果结果见表1。阴性对照组与阳性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)；且不同剂量氨水组肺脏的MDA、GSSG含量均有显著增加(P<0.05)，而GSH、全血GSH-Px差异无统计学意义。
2.2全血分析不同剂量组WBC与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)，说明可减轻炎症反应；RBC、HGB、PLT各组差异无统计学意义，(表2)。
3讨论
窒息性气体作用迅速，危及范围大，带来社会不稳定因素。它的发生往往是突发的和难以预料的。急性光气吸入中毒的主要病理改变是肺水肿，潜伏期是肺水肿的发生与发展阶段，中毒者吸人光气后均经一定的潜伏期(1.5h～3d)才出现呼吸系统损害的临床表现。潜伏期的长短与病情严重程度有关[6]，潜伏期越短，病情越重。如能及时给予适当的治疗，可阻断或减轻肺水肿的发生与发展。待肺水肿发生后再采取措施，治疗就甚为困难。故提出现场防护是十分必要的，本实验为此提供了新的思路和依据。
有研究证明光气是一种氧化性气体，光气中毒后，机体的总抗氧化力(TAO)显著下降，机体MDA、GSSG显著增加，GSH显著减少，且与中毒剂量有明显的剂量和效应关系[7]。降低氧化指标已成为有效的治疗措施之一。光气在水中不易溶解，这是它比其它气体更易引起中毒的原因，而它在碱性环境下溶解度会增加[6]；光气本身又是一种酸性气体，与碱作用后失去毒性，因此本实验考虑运用碱性液体防治中毒。结果证明光气染毒时，给予吸入氨气可中和光气，减弱毒性，使体内的氧化指标有明显的降低。这提示我们接触光气时，吸入挥发性碱性中和液一方面可以与光气酸碱中和，降低其氧化性对肺脏所造成的损伤，另一方面也可以对光气中毒后的ARDS引起的酸中毒起治疗作用。
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